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康為世紀 植物RNA提取試劑盒 (DNase I)

  • 型   號:CW2598S
  • 價   格:

產品名稱:康為世紀 植物RNA提取試劑盒 (DNase I)
產品貨號:CW2598S
英文名稱:OminiPlant RNA Kit (Dnase I)
產品規格:50 preps

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產品介紹:

 本試劑盒適用于從多種植物中提取RNA,即便是從多糖多酚含量豐富的植物中也能成功提取高質量的RNA,如水稻葉片、小麥葉片、玉米葉片、煙草葉、松針、銀杏葉、楊樹葉、石榴葉、冬青葉、蘋果、桃、梨、西紅柿、櫻桃、杏、香蕉、葡萄、枇杷、桂圓果皮、桂圓果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、大豆等樣本。*的裂解液配方,可使細胞中的RNA酶迅速滅活,有效去除多糖多酚對RNA提取的影響,無需苯酚、氯仿等試劑,同時采用硅基質膜吸附RNA進行純化,提取的總RNA純度高,無基因組、蛋白質和其它雜質的污染,可用于Real Time RT-PCR、RT-PCR 、Northern Blot、Dot Blot、和體外翻譯等多種下游實驗。


產品名稱:康為世紀 植物RNA提取試劑盒 (DNase I)

產品貨號:CW2598S



產品組份:

 組分5.png

操作步驟:

1.勻漿處理:取50-100mg植物組織在液氮中迅速研磨成粉末,加入500 μl Buffer RLS(使用前請先檢查是否加入β-巰基乙醇),立即渦旋劇烈震蕩混勻。

2.4°C 12,000 rpm(~13,400×g)離心2分鐘。

3.將上清液轉入已裝入收集管的過濾柱(Spin Columns FS)中,4°C 12,000 rpm離心1分鐘,小心吸取收集管中的上清并轉移至新的RNase-Free 離心管(自備)中,槍頭盡量避免接觸收集管中的細胞碎片沉淀。

4.緩慢加入0.5倍上清體積的無水乙醇,混勻(此時可能會出現沉淀),將得到的溶液和沉淀一起轉入已裝入收集管的吸附柱(Spin Columns RM)中,若一次不能將全部溶液加入吸附柱中,請分兩次轉入。4°C 12,000 rpm離心1分鐘,棄廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

5.向吸附柱RM中加入350 μl Buffer RW1,4°C 12,000 rpm離心1分鐘,棄廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

6.配制DNase I 混合液:取52 μl RNase-Free Water,向其中加入8 μl 10×Reaction Buffer和20 μl DNase I(1 U/μl),混勻, 配制成終體積為80 μl的反應液。

7.向吸附柱中直接加入80 µl DNase I 混合液,20-30℃孵育15分鐘。

8.向吸附柱RM中加入350 μl Buffer RW1,4°C 12,000 rpm離心1分鐘,棄廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

9.向吸附柱RM中加入500 μl Buffer RW2(使用前檢查是否加入無水乙醇), 4°C 12,000 rpm離心1 分鐘,棄廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

10.重復步驟9。

11.4°C 12,000 rpm離心2分鐘。

12.將吸附柱RM裝入新的RNase-Free Centrifuge Tubes(1.5 ml)中,向吸附膜的中間部位懸空滴加30-50 μl RNase-Free Water,室溫放置2分鐘,4°C 12,000 rpm離心1分鐘,得到的RNA溶液保存在-70℃,防止降解。


相關知識:

從不同細胞中分離提取高純度、高質量的RNA對于很多分子生物學實驗至關重要,如cDNA的合成、Northern印記分析、mRNA差別顯示技術分離基因以及轉錄組測序等等實驗,很大程度上取決于RNA的完整性。然而由于RNA自身結構的特點,以及周圍環境中眾多而又穩定存在的RNA酶,常常會使得RNA發生降解。在植物果實組織中,如玉米籽粒、柑橘、香蕉,含有豐富的多糖、蛋白,由于多糖與RNA在溶解性上高度一致,導致二者形成非常難溶的膠狀復合物,使得RNA提取量下降,并造成一定程度上的降解;在植物老化組織中,如玉米老葉、冬青葉、茶葉,含有大量的多酚,當其氧化后,會使得RNA沉淀變成褐色,干擾了后續實驗;有些產生次生代謝組織,如葡萄、蘋果、甘蔗,其次生產物會降低RNA的獲取率。


產品訂購信息:

品牌             貨號                   名稱                                      規格

康為世紀   CW2598S  OminiPlant RNA Kit (Dnase I)     50preps


產品名稱:康為世紀 植物RNA提取試劑盒 (DNase I)

產品貨號:CW2598S


關于公司:

康為世紀是主要從事高附加值、高技術含量的生物試劑的研發與生產,為生命科學研究、基因檢測和體外診斷用戶提供創新型生物產品和服務??禐槭兰o建立了專業化、集約化、能夠形成自主知識產權的技術創新體系和開放式的合作創新平臺,構建成了公司完整的研發創新體系。產品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護劑、核酸提取試劑盒、分子診斷檢測試劑等,打破了中國生物研究與產業對進口試劑的依賴。


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